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玻璃层析柱你了解吗?
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【摘要】:
玻璃层析柱或有机玻璃管是凝胶层析技术的主体。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中的分配系数不同,分离出一种层析方法。
分析柱的直径不影响分离度,样品量大,可增加柱的直径。一般制备的凝胶柱直径大于2厘米,但样品应均匀分布在凝胶柱床面上。此外,直径增大,洗脱液体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱的高度了分离不同的成分,凝胶柱床必须有合适的高度。分离度与柱高的平方根有关。但由于软凝胶柱过高,挤压变形堵塞一般不超过1米。分离时使用短柱,一般凝胶柱长20-30cm,柱高与直径相比为5:1-10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。柱高与直径之线为20:1-100:1,常用凝胶柱为50×25cm,10×25cm。层析柱滤板下的死体积应尽可能小。如果支持滤板下的死体积较大,则更有可能在分离成分之间重新混合。其结果是影响洗脱峰形,导致尾部延迟,降低分辨率。精确分离时,死体积不得超过总床体积的1/1000。
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玻璃管道的缠绕工艺。
玻璃层析柱的操作方法
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