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玻璃层析柱玻璃层析柱厂家浙江玻璃层析柱价格:玻璃层析柱的操作方法

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【摘要】:
玻璃层析柱的操作方法。以提取和分离冬凌草甲素为例:
1.吸附剂的处理和柱子的填充。
将一定量的薄层层析硅胶放入搪瓷盘中,放入烘箱中,105。激活2H后,取出放置室温即可装柱。柱子用干法填充,填充整个柱子,不留死体积。密封后,用柱塞式计量溶剂泵按丙酮-石油醚(5:95)的比例泵入溶剂,直至溶剂流出。

玻璃层析柱玻璃层析柱厂家浙江玻璃层析柱价格:玻璃层析柱的操作方法。以提取和分离冬凌草甲素为例:
1.吸附剂的处理和柱子的填充。
将一定量的薄层层析硅胶放入搪瓷盘中,放入烘箱中,105。激活2H后,取出放置室温即可装柱。柱子用干法填充,填充整个柱子,不留死体积。密封后,用柱塞式计量溶剂泵按丙酮-石油醚(5:95)的比例泵入溶剂,直至溶剂流出。
2.上样
用适量丙酮溶解冬凌草的乙醇提取物400G,泵入中压柱头,然后泵入石油醚1000RID。
3.洗脱
将一定比例的石油醚一丙酮作为洗脱液,以60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~3KG/C。按每份500ML收集,TLC检测展开剂丙酮一氯仿(2:8),显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液。
完全洗脱,合并相同流份,回收溶剂。将冬凌草甲素流份蒸干。加入适量甲醇热溶后自然放置,沉淀结晶,为冬凌草甲素。
4.层析柱的再生和平衡。
经TLC检测,有效成分全部流出,用纯丙酮5000ML再生,丙酮一石油醚(5:95)平衡后,可再次上样,重复使用(使用次数随原料而异,一般可连续使用2-6个月以上)。
5.重结晶
冬凌草甲素结晶析出后,减压过滤,然后用少量甲醇洗涤(保留洗涤液,下次用于冬凌草甲素热溶)。冬凌草甲素再用适量甲醇热溶后放置,结晶再沉淀,待结晶完全后,抽滤,用少量乙醚洗涤,将结晶室温下晾干,放入真空干燥箱中,35度真空干燥至恒重。密封在瓶子里,存放在干燥器里。
6.薄层分析。
取适量冬凌草甲素对照品和上述方法获得的冬凌草甲素样品甲醇溶解后,点在同一硅胶G薄层板上,以氯仿丙酮(8:2)为展开剂展开,5%香草醛浓硫酸乙醇液显色,105。将c烘干至斑点清晰。表明在展开系统下,冬凌草甲素样品和对照产品具有相同的射频值,呈现相同的蓝绿色斑点,在制备的冬凌草甲素样品中没有杂质斑点。